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动物实验:小鼠脊髓损伤模型的构建及药物治疗

一、嘉美实验小鼠脊髓损伤模型的构建
采用动脉夹夹伤法复制小鼠脊髓损伤模型,观察不同时间点脊髓组织和肺组织的变化。

二、操作步骤及药物治疗
1、20只雌性C57BL/6小鼠随机分为5组,即: control (正常小鼠) + Vehicle (0.9% NaC),SCI+ Vehicle (0.9% NaCl), SCI + BAY 11-7082 (20 mg/kg daily ip.), SCI + A438079(80mg/kg daily ip), SCI+ SS-31 (5mgkg dailyip.),每组4只。1%戊巴比妥钠60mg/kg腹腔注射麻醉小鼠,背部备皮消毒,以T4-T5棘突为中心取后正中切口,逐层分离,钝性分离椎旁肌,显露T3-T6棘突及椎板,咬除T3-T6的椎板,暴露脊髓,保护硬脊膜,动脉夹水平夹在脊椎对应的背侧脊髓lmin,止血后逐层缝合肌肉与皮肤。术后3天每天肌注 5万单位青霉素钠抗感染,每日人工辅助排尿2次SOI+BAY 11-7082 组小鼠腹腔注射BAY 11-7082,剂量为20 mg/kg; SCL+ A438079组小鼠腹腔注射A438079剂量为 80mgkg; SCI+ SS-31组小鼠腹腔注射SS-31,剂量为5mgkg; control + Vehicle组和SCI + Vehicle组小鼠腹腔注射等体积生理盐水。各组小鼠均每天给药一次,连续给药3d。各组小鼠于72h或6周后取脊髓(以损伤位置为中点,全长1厘米)和肺组织,进行后续检测,其中进行Luxol Fast Blue/Cresyl Violet 染色(坚牢蓝-焦油固紫染色) 6周后取材,纵行切片(冠状位);其他72h取材,行横断切片(轴位)。

2、小鼠脊髓损伤后,均表现为双后肢瘫痪,拖行,初期部分小鼠有血尿,且均需要人工辅助排尿,青毒素抗炎后,血尿逐步消失。随时间延长,小鼠瘫痪状态有一定程度改善,可能与脊髓自我修复有关。给药组小鼠恢复程度较模型组小鼠快,至6周取材前,后肢手捏有通感,后脚可收起,自然爬行时偶尔受力,有蹬踏动作。 本实验共造模45只小鼠,死亡16只,死亡率35.6%。
 
   

   
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