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特殊染色:阿利新蓝-过碘酸-雪夫(AB-PAS)染色实验案例

1、临床应用
用于胃标本组织切片的胃粘膜上皮肠化生分类、糖原和粘液物质形态观察前的染色。主要应用于胃粘膜上皮化生分类。在胃粘膜活检时,判别肠化生的类型较之受累程度可能更为重要。在判别完全或不完全性肠化生时,一般的HE染色即可辩认,但判别是大肠型或小肠型,必须采用AB、PAS及HID粘液的组化染色。阿利新蓝染色液(PH2.5)用于显示酸性粘液物质,主要应用于粘液性疾病的鉴别诊断。PAS过碘酸雪夫氏染色液用于糖原和黏液物质染色,主要应用于鉴别细胞内的空泡状变性及心肌病变和心血管方面的疾病,还可用于鉴别观察缺血缺氧早期心肌坏死或梗死区的糖原和糖原累积疾病,糖尿病器官,某些肿瘤的(如:肝细胞瘤、胆管瘤、横纹肌等)诊断及研究。主要用于糖元、中性粘液的染色。

2、适用范围

适宜于组织的石蜡切片、冰冻切片、火棉胶切片、树脂切片等染色

3、原理方法
阿利新蓝-过碘酸雪夫氏套染法

3、PAS染色液
A试剂(高碘酸) B试剂(Schiff氏试剂)

4、染色方法
切片脱蜡水洗后:
1)AB染色液(阿利新蓝染色液PH2.5)染色5~10分钟,水洗;
2)PAS染色液A试剂(高碘酸)染色5分钟,蒸馏水洗;
3)PAS染色液B试剂(Schiff氏试剂)染色5~10分钟,水洗;
4)脱水、透明、封固、镜检。
结果参考:硫酸化粘液呈黑色,酸性粘液呈兰色,中性粘液呈红色。

5、AB染色液(阿利新蓝染色液PH2.5)做酸性粘液物质染色时操作说明
染色方法:切片脱蜡水洗后:
1)阿利新蓝染色液染色5~10分钟,水洗至无染料脱落;
2)脱水、透明、封固、镜检。
结果参考:酸性粘液物质呈蓝色。

6、PAS染色液(过碘酸雪夫氏染色液)做糖元、中性粘液染色时操作说明
染色方法:切片脱蜡水洗后:
1)高碘酸染色5分钟,蒸馏水洗;
2)Schiff氏试剂染色5~10分钟,水洗;
3)脱水、透明、封固、镜检。
结果参考:糖元、中性粘液物质呈红色。

7、实验操作体会及说明
1)在胃粘膜活检时,判别肠化生的类型较之受累程度可能更为重要。在判别完全或不完全性肠化生时,一般的HE染色即可辩认,但判别是大肠型或小肠型,必须采用PAS、AB或HID粘液的组化染色。
2)根据肠化生上皮分泌粘液的情况以及其所分泌粘液的性质,将肠化生分为几种:Ming(1967)将肠化生分为完全型及不完全型。肠化生的杯状细胞间的柱状上皮可为分化成熟的带刷状缘发育不完全而且胞浆内还可见粘液颗粒称此为不完全型肠化生。Teglbjaerg(1978)将肠化生细胞分泌乙酰基唾液酸和硫酸粘蛋白及不分泌这类粘蛋白的肠化生分别称之为大肠型肠化生和小肠型化生;Jass(1988)则将肠化生分为Ⅰ型,即类似小肠的完全型肠化生;Ⅱ型肠化生,即杯状细胞间以分泌粘液的细胞的不完全型肠化生,又将杯状细胞含有唾液酸粘液而柱状细胞含中性粘液者称为ⅡA型肠化生,将含硫酸粘液或同时含唾液者称之为ⅡB型肠化生。

8、部分结果案例







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