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外泌体整体实验

1、提供外泌体整体实验方案:客户根据课题标书及需做实验的主体内容,拟定并提供初步的项目方案,含课题申请书,实验方案,实验设计,实验思路,实验文献等与实验相关等内容和资料。或者由嘉美实验协助实验委托者完成外泌体整体实验方案的设计。
2、项目评估报价:公司技术团队根据客户提供的相关资料,综合评估项目可行性,与客户共同确定准确的实验项目执行方案,给出准确的实验价格。嘉美实验协助设计的课题直接给出准确的报价。
3、签订服务协议:签署服务协议并预付部分费用,做好实验初步准备及项目预安排。
4、执行服务项目:正式启动实验进程,全面展开实验,确保项目有效执行。
5、沟通项目进展:及时沟通反馈实验的最新进展,随时了解掌控实验的最新动态。
6、完成项目交付:支付剩余尾款,交付实验结果,正确应用实验结果,提供售后服务。
 
 

一、外泌体介绍
外泌体(Exosome),一种能被大多数细胞分泌的微小膜泡,具有脂质双层膜结构,直径约为40-100nm。20世纪80年代,外泌体被描述为一种从网织红细胞分泌的内体来源的囊泡。在近些年的实验研究中,人们发现这种微小膜泡中含有细胞特异的蛋白、脂质和核酸,能介导体内不同细胞类型之间的细胞间通讯,从而影响正常和病理状态。

最近的研究发现细胞外囊泡(EVs,包括 Exosomes和Microvesicles等)已经成为细胞间通讯的重要介质,参与原核生物和高等真核生物细胞之间的生物信号传递,以调节不同范围的生物过程。细胞外囊泡在很多生理病理上也起着重要的作用,如免疫中抗原呈递、肿瘤的生长与迁移、组织损伤的修复等。此外,未修饰和工程化的细胞外囊泡可能在大分子药物递送中具有应用价值。不同细胞分泌的外泌体具有不用的组成成分和功能,可作为疾病诊断的生物标志物。外泌体具有脂质双层膜结构,能很好的保护其包被的物质,且能靶向特定细胞或组织,因此是一种很好靶向给药系统(targeted delivery system)。

外泌体作为一个新型的研究热点,由于它在体内存在的广泛性和获取的便捷性,已经成为了疾病诊断治疗的潜在有效方式,在精准医学发展上有着光明的前景。


二、外泌体部分单项检测项目
1、外泌体粒径分析
从细胞上清、外周血、尿液、腹水等提取分离的外泌体,通常需要对其粒径进行检测,已确定不同来源外泌体的粒径范围。根据Stokes-Einstein原理,外泌体颗粒的布朗运动会导致动态光散射效应,散射光波动随时间发生变化,检测器将散射光信号转化为电流信号并做运算处理,通过外泌体的溶液扩散系数得出其粒径分布。嘉美实验提供优质可靠的外泌体粒径分析服务,作为外泌体整体研究服务的一项重要内容,确保了后续实验结果的准确性与可靠性。

 
2、外泌体表面蛋白标记检测
从细胞上清、外周血、尿液或腹水等中提取的外泌体,常见的特异性标记蛋白为CD63 和CD81,使用荧光直标抗体和流式细胞仪检测,能够统计出提取分离之后外泌体的阳性百分比,从而判断外泌体的纯度。嘉美实验提供外泌体表面标记物检测服务,作为外泌体整体研究服务的一项重要内容,确保了后续实验结果的准确性与可靠性。

 
3、外泌体Small RNA测序
  1)服务优势
    (1)专利外泌体抽提技术,配合特有微量RNA建库方法,提供miRNA测序整体服务
    (2)采用3个外泌体或囊泡数据库,注释信息更完善,为深入挖掘结果提供佐证
    (3)提供肿瘤研究的临床数据分析,使得分析结果更加饱满
    (4)4个最新数据库预测靶基因,结果更准确

 

 
 2)外泌体中miRNA常见功能
Small RNA主要包含miRNA、piRNA、tsRNA和snoRNA等RNA分子。小RNA参与基因表达与调控、RNA的加工与剪切、蛋白质翻译、遗传“入侵”抑制、配子发生等重要生物学过程,是生命活动中不可少的调控因子。微小RNA(microRNA,简称miRNA)是小RNA的最主要部分,已被证明与包括癌症、心血管疾病、免疫系统疾病在内的多种疾病密切相关。如:miRNA可以被外泌体运输到其他细胞组织,为癌细胞转移创造合适的微环境,从而促进癌细胞转移。此外,外泌体miRNA也可以作为疾病的生物标志物,广泛应用于疾病诊断、个性化治疗和预后等领域。高通量测序技术可以在单次测序中获得样品中所有小RNA的序列信息,从而分析不同疾病状态、不同样品来源、不同处理条件下小RNA的表达水平,并精确比较其之间的小RNA表达差异,从而为后续研究小RNA的生物学意义提供指引。

  3)外泌体研究全面技术路线
 
  4)高通量测序与分析流程

 
  5)生物信息学分析项目

测序类型 基本分析 高级分析
外泌体
小RNA测序
1、 数据质量评估及QC
2、 序列比对
3、 全基因组Reads分布图谱
4、 ncRNA分类与注释
5、 已知miRNA分析
  5.1 已知miRNA表达量
  5.2 已知miRNA整体表达量分析
  5.3已知miRNA长度
  5.4 已知miRNA碱基偏好性分析 
6、 基因组重复区域注释
7、 功能元件注释
8、 新miRNA预测
9、 共有及特有序列分析
10、 样品间miRNA表达差异分析
11、 miRNA家族分析(仅限于模式物种)
12、 miRNA保守性分析(仅限于模式物种)
13、 miRNA碱基编辑分析
14、 样品间相关性分析
15、 样品间主成份分析
16、 差异表达miRNA靶基因预测(已知miRNA,仅限于人/大鼠/小鼠三个物种)
16.1 miRNA基本信息
16.2 靶基因预测方法介绍
16.3 靶基因预测结果
16.4 候选靶基因
17、 差异表达miRNA靶基因的KEGG通路富集分析
18、 差异表达miRNA靶基因的GO功能富集分析
1、 miRNA靶基因预测(非模式物种或新miRNA)
2、 新miRNA差异表达分析
3、 miRNA疾病数据库注释(仅限于人)
4、 外泌体数据库注释(仅限于人/大鼠/小鼠三个物种)
 
 
tsRNA分析
1、 tsRNA来源分析
2、 tsRNA表达量分析
3、 ts差异分析
4、 tsRNA表达聚类分析

4、外泌体 lncRNA 测序
  1)服务优势
    (1)专利外泌体抽提技术,配合特有微量RNA建库方法,提供lncRNA测序整体服务
    (2)采用3个外泌体或囊泡数据库,注释信息更完善,为深入挖掘结果提供佐证
    (3)多种差异表达计算方法,可根据项目情况灵活选择算法,展现更完美的数据
    (4)全新的比对软件,分析速度更快,结果更准确
    (5)提供肿瘤研究的临床数据分析,使得分析结果更加饱满。

  2)外泌体研究全面技术路线

 
3)高通量测序与分析流程

 
4)生物信息学分析项目
 
测序类型 基本分析 高级分析
外泌体
lncRNA测序
数据质量评估及QC
核糖体RNA去除率计算
参考基因组比对与全基因组reads分布图谱
基因表达量整体水平
样品(组)间基因表达差异分析
差异基因KEGG生物通路富集分析
差异基因 Gene Ontology (GO)功能富集分析
转录本表达量整体水平
已知mRNA表达量
已知mRNA表达差异分析
已知ncRNA表达量
已知ncRNA表达量差异分析
哺乳动物已知ncRNA保守性分析
· 近缘物种的保守性分析
· Phylop保守性分析
SNP和InDel检测及注释
样品间相关性分析
样品间主成分分析
时间序列分析(与分析5二选一)
以下限50条序列分析(仅限于人、大鼠、小鼠物种)
lncRNA靶基因预测
lncRNA与靶基因互作分析
lncRNA靶基因KEGG生物通路富集分析
lncRNA靶基因Gene Ontology (GO)功能富集分析
1、共表达分析(样品>=10)
2、lncRNA Disease注释
3、肿瘤药物注释
3.1 肿瘤耐药基因注释
3.2肿瘤靶向药物注释
4、基因融合分析
5、可变剪切分析(rMATs)
6、lncRNA-miRNA互作分析
7、基因富集分析(GSEA)
(每组至少3个生物学重复样品)
8、加权基因共表达网络分析
(WGCNA)(加权基因共
表达网络分析,样品>=10)
9、RNA结合蛋白预测
10、已知lncRNA甲基化注释
11、eRNA分析
12、外泌体特有基因注释

三、外泌体整体实验成果展
1、华中科技大学的郭安源教授和李秋柏教授合作发布首个大样本量的细胞外膜泡miRNA数据库
Liu, T., et al. (2018). "EVmiRNA: a database of miRNA profiling in extracellular vesicles." Nucleic Acids Res.  IF=11.561

2、中山大学肿瘤防治中心谢丹教授等:外泌体中的circRNA-PRMT5通过miR-30c海绵促进膀胱尿路上皮癌的转移并诱导EMT
Chen, X., et al. (2018). "PRMT5 Circular RNA Promotes Metastasis of Urothelial Carcinoma of the Bladder through Sponging miR-30c to Induce Epithelial-Mesenchymal Transition." Clin Cancer Res.  IF=10.199

3、东南大学中大医院马坤岭教授:血小板微粒介导早期糖尿病肾病的肾小球内皮损伤
Zhang, Y., et al. (2018). "Platelet Microparticles Mediate Glomerular Endothelial Injury in Early Diabetic Nephropathy." J Am Soc Nephrol 29(11): 2671-2695.  IF=8.655
肾小球内皮功能障碍在早期糖尿病肾病的发病机制中起着至关重要的作用,这可能是由循环代谢异常引起的。血小板微粒、从活化的血小板释放的细胞外囊泡,最近已被发现是血管功能障碍的新型调节剂。该报道通过链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠和原代大鼠肾小球内皮细胞研究了血小板微粒对早期糖尿病肾病肾小球内皮损伤的影响。通过流式细胞术测量分离的血小板微粒。结果发现,糖尿病大鼠血浆血小板微粒明显增加,阿司匹林治疗的动物受到抑制。在培养的肾小球内皮细胞中,血小板微粒诱导活性氧的产生,降低一氧化氮水平,抑制内皮一氧化氮合酶和SOD的活性,增加肾小球内皮屏障的渗透性,以及减少内皮表层的厚度。相反,阿司匹林对体内血小板微粒的抑制改善了肾小球内皮损伤。进一步分析表明,血小板微粒激活了肾小球内皮细胞中mTORC1通路;雷帕霉素或raptor siRNA对mTORC1途径的抑制在体内和体外显著保护免受微粒诱导的肾小球内皮损伤。此外,血小板微粒来源的趋化因子配体7(CXCL7)促成肾小球内皮损伤,并且使用CXCL7中和抗体或用CXCR1和CXCR2的竞争性抑制剂阻断CXCL7受体来拮抗CXCL7显著减弱了这种损伤。这些研究结果证明了血小板微粒在肾小球内皮功能障碍中的致病作用,并提出了一种潜在的治疗靶点CXCL7,用于治疗早期糖尿病肾病。

4、武汉大学谢敏教授、许昱教授:通过ZnO纳米线涂覆的三维支架芯片装置检测外泌体
Chen, Z., et al. (2018). "Detection of exosomes by ZnO nanowires coated three-dimensional scaffold chip device." Biosens Bioelectron 122: 211-216.  IF=8.173
外泌体有可能成为用于非侵入性癌症诊断的新型生物标志物。然而,在常规临床环境中经济有效地检测外泌体仍然具有挑战性。该报道提出了ZnO纳米线涂覆的三维(3D)支架芯片装置,用于有效的免疫捕获和外泌体的经典可视化比色检测。芯片器件由自立式ZnO纳米线阵列覆盖的3D聚二甲基硅氧烷(PDMS)支架组成。3D支架的互连微孔诱导具有混沌或涡旋特征的流体流动,并且ZnO纳米线阵列提供用于固定外泌体特异性抗体的大表面积以及用于保留外泌体的尺寸排阻样效应。这些协同且显著增强了外泌体在高流速下的捕获。通过辣根过氧化物酶(HRP)标记的抗体检测捕获的外泌体,其可以启动基于四甲基联苯胺(TMB)的比色检测。外泌体的定量读数很容易通过紫外-可见光谱法或酶标仪实现,线性范围为2.2×10(5)至2.4×10(7)个颗粒/μL,最小可检测浓度为2.2×10(4)个颗粒/μL。该芯片装置适用于临床样品,其中癌症患者与健康个体相比显示出外泌体数量在统计学上显著增加。因此,该芯片设备具有成本效益且易于使用,便于可见和比色测定,对临床应用具有高灵敏度。

5、南方医科大学:通过Au Nanoflare探针原位检测血浆外泌体miRNA-1246用于乳腺癌诊断
Zhai, L., et al. (2018). "In Situ Detection of Plasma Exosomal MicroRNA-1246 for Breast Cancer Diagnostics by a Au Nanoflare Probe." ACS Appl Mater Interfaces.  IF=8.097
乳腺癌是全球女性癌症死亡的第二个原因。早期检测、治疗和转移监测对于预后非常重要。尽管传统的诊断方法,例如乳房X射线乳房摄影和图像定位活组织检查可准确检测,但它们可能对患者造成放射性或侵入性损伤。液体活检作为一种非侵入性方法,便于在临床癌症预后、转移评估和复发监测中重复采样。包裹在循环外泌体中的微小RNA由于其癌症特异性表达谱而有希望成为候选癌症生物标志物。该研究报告通过核酸功能化的Au nanoflare探针在人血浆外泌体中原位检测miR-1246作为乳腺癌生物标志物。由于该方法从血浆样品中分离外泌体不需要耗时太长且叫廉价,也不需转染手段,Au纳米荧光探针可以直接进入血浆外泌体特异性靶向miR-1246以定量地产生荧光信号。用探针孵育4小时只需要40 μL血浆,使信号足够灵敏,可以将乳腺癌样本与正常对照区分开来。使用该测定法检测的血浆miR-1246水平作为标记物,从28个健康对照中区分46个乳腺癌患者,在最佳截止值下具有100%的灵敏度和92.9%的特异性。Au纳米荧光探针的这种简单、准确、灵敏且经济的液体活检有效地被开发为用于临床适应的非侵入性乳腺癌诊断测定。

6、【综述】山东大学:药物纳米制剂靶向脑的最新进展
Khan, A. R., et al. (2018). "Recent progress of drug nanoformulations targeting to brain." J Control Release 291: 37-64.  IF=7.877
这是一篇关于跨越血脑屏障(BBB)向脑组织递送药物的综述文章。

7、南京医科大学:外泌体传递的lncRNA PTENP1抑制膀胱癌进展
Zheng, R., et al. (2018). "Exosome-transmitted long non-coding RNA PTENP1 suppresses bladder cancer progression." Mol Cancer 17(1): 143.  IF=7.776


8、江苏大学医学院:肿瘤来源的外泌体诱导中性粒细胞的N2极化以促进胃癌细胞迁移
Zhang, X., et al. (2018). "Tumor-derived exosomes induce N2 polarization of neutrophils to promote gastric cancer cell migration." Mol Cancer 17(1): 146.  IF=7.776

 


9、山东大学:尿液中外泌体lncRNA的表达特征作为膀胱癌诊断和复发预测的新型非侵入性生物标志物
Zhan, Y., et al. (2018). "Expression signatures of exosomal long non-coding RNAs in urine serve as novel non-invasive biomarkers for diagnosis and recurrence prediction of bladder cancer." Mol Cancer 17(1): 142.  IF=7.776
最近,已有很多报道提出外泌体长链非编码RNA(lncRNA)的表达特征作为癌症检测的潜在的非侵入性生物标志物。这项研究的目的是开发一种尿外泌体(UE)衍生的lncRNA组,用于膀胱癌(BC)的诊断和复发预测。进行定量实时聚合酶链反应(qRT-PCR)以筛选和评估训练组(208个尿液样品)和验证组(160个尿液样品)中8个候选lncRNA的表达。建立由三种不同表达的lncRNA(MALAT1、PCAT-1和SPRY4-IT1)组成的组用于训练组中的BC诊断。随后,在验证组中进一步验证了该组的性能。此外,Kaplan-Meier分析表明,PCAT-1和MALAT1的上调与非肌肉浸润性BC(NMIBC)的无复发生存率(RFS)无关,多变量Cox比例风险回归分析显示,外泌体PCAT-1过表达是NMIBC RFS的独立预后因素。总之,研究结果表明,UE衍生的lncRNAs在BC的诊断和预后中具有相当大的临床价值。

10、武汉大学人民医院:肿瘤来源的外泌体miR-155激活肿瘤相关的恶病质发生最终促进肿瘤进展
Wu, Q., et al. (2018). "Tumour-originated exosomal miR-155 triggers cancer-associated cachexia to promote tumour progression." Mol Cancer 17(1): 155.  IF=7.776
武汉大学人民医院:肿瘤来源的外泌体miR-155激活肿瘤相关的恶病质发生最终促进肿瘤进展

11、【综述】郑州大学一附院:外泌体miRNA对癌症生物学和临床应用的影响
Sun, Z., et al. (2018). "Effect of exosomal miRNA on cancer biology and clinical applications." Mol Cancer 17(1): 147.  IF=7.776

12、香港城市大学:利用3D等离子体光子晶体生物传感器高度灵敏地检测外泌体
Zhu, S., et al. (2018). "Highly sensitive detection of exosomes by 3D plasmonic photonic crystal biosensor." Nanoscale 10(42): 19927-19936.  IF=7.233

13、中科院生物物理所&东南大学:用于白血病源外泌体的灵敏荧光生物传感的双信号放大平台
Huang, L., et al. (2018). "A dual-signal amplification platform for sensitive fluorescence biosensing of leukemia-derived exosomes." Nanoscale.  IF=7.233

14、南京医科大学:外泌体介导自发性高血压大鼠外膜成纤维细胞转移ACE(血管紧张素转换酶)促进血管平滑肌细胞迁移
Tong, Y., et al. (2018). "Exosome-Mediated Transfer of ACE (Angiotensin-Converting Enzyme) From Adventitial Fibroblasts of Spontaneously Hypertensive Rats Promotes Vascular Smooth Muscle Cell Migration." Hypertension 72(4): 881-888.  IF=6.823
血管平滑肌细胞(VSMC)的迁移是高血压血管重塑的关键。血管外膜成纤维细胞(AF)在血管结构的稳态中很重要。本研究旨在探讨AF外泌体(AFE)在VSMC迁移和基础机制中的作用。从自发性高血压大鼠(SHR)和Wistar-Kyoto(WKY)大鼠的主动脉获得原代VSMC和AF。用Boyden室测定法和伤口愈合测定法评估VSMC迁移。来自SHR的AFE得到促进,但来自WKY大鼠的AFE对VSMC迁移没有显著影响。通过外泌体抑制剂GW4869、AT1R(Ang II [血管紧张素II] 1型受体)拮抗剂氯沙坦或ACE(血管紧张素转换酶)卡托普利的抑制剂来抑制AFE对VSMC迁移的影响。SHR的AFE含量和活性远高于WKY大鼠。来自SHR的AFE和来自WKY大鼠的AFE之间的Ang II和AT1R mRNA和蛋白质水平没有显著差异。来自SHR的AFE增加WKY大鼠和SHR的VSMC中的Ang II和ACE含量和ACE活性。卡托普利可预防Ang II含量和ACE活性的变化。AF中的ACE敲低降低了SHR中AFE的ACE含量和活性,并抑制了AFE诱导的WKY大鼠和SHR大鼠VSMC的迁移。这些结果表明,来自SHR的AF的外泌体将ACE转移至VSMC,其增加Ang II水平并激活VSMC中的AT1R,从而促进VSMC迁移。

15、武汉大学:黑色素瘤细胞分泌的外泌体miR-155-5p通过SOCS1/JAK2/STAT3信号通路诱导癌相关成纤维细胞的促血管生成
Zhou, X., et al. (2018). "Melanoma cell-secreted exosomal miR-155-5p induce proangiogenic switch of cancer-associated fibroblasts via SOCS1/JAK2/STAT3 signaling pathway." J Exp Clin Cancer Res 37(1): 242.  IF=6.217
背景:癌症相关成纤维细胞(CAF)促进肿瘤血管生成已被广泛报道。然而,CAF的促血管生成的潜在机制仍然知之甚少。本研究旨在阐明CAF促血管生成的机制。用B16和B16F10衍生的外泌体处理NIH/3T3细胞。然后通过RT-PCR和Western印迹检测CAFs标记和促血管生成因子。进行CCK-8测定、transwell迁移测定,管形成测定和体内Matrigel栓测定以确定CAF的促血管生成能力。Western blot和AG490用于研究JAK2/STAT3信号通路在CAF促血管生成中的作用。使用生物信息学分析,荧光素酶报告基因测定,microRNA模拟物和抑制剂以及异种移植物模型来研究mmu-miR-155-5p(miR-155)在CAF的促血管生成中的作用。结果显示黑色素瘤细胞分泌的外泌体可以诱导成纤维细胞重编程为CAFs,并且外泌体miR-155可以触发CAF的促血管生成。通过直接靶向细胞因子的抑制剂,机制上可将外泌体miR-155递送到成纤维细胞中并通过靶向SOCS1促进促血管生成因子的表达,包括VEGFa、FGF2和MMP9。SOCS1的下调激活JAK2/STAT3信号传导途径并提高成纤维细胞中VEGFa、FGF2和MMP9的表达水平。用含有过表达miR-155的外泌体处理可以促进血管生成,并且黑素瘤细胞分泌的外泌体中miR-155的减少在体外和体内减缓血管生成。这些结果表明,通过SOCS1/JAK2/STAT3信号通路促进受体成纤维细胞中促血管生成因子的表达,黑素瘤细胞分泌的外泌体miR-155可诱导CAF的促血管生成。尽管肿瘤血管生成受各种因素的调节,但外泌体miR-155可能是控制黑素瘤血管生成的潜在靶标,并可用于建立治疗黑素瘤的新策略。

16、清华大学:基于通用Ti3C2 MXenes的自标准比率荧光共振能量转移平台用于高灵敏度检测外泌体
Zhang, Q., et al. (2018). "Universal Ti3C2 MXenes Based Self-Standard Ratiometric Fluorescence Resonance Energy Transfer Platform for Highly Sensitive Detection of Exosomes." Anal Chem.  IF=6.042
外泌体作为疾病预测和诊断的新型非侵入性生物标志物,在监测与癌症相关的公共卫生问题方面显示出了令人着迷的前景。该研究将独特的Cy3标记的CD63适体(Cy3-CD63适体)/Ti3C2 MXenes纳米复合物构建为用于定量检测外泌体的自标准比率荧光共振能量转移(FRET)纳米探针。Cy3-CD63适体可以通过适体和MXenes之间的氢键和金属螯合物相互作用选择性地吸附到Ti3C2 MXene纳米片上,并且由于Cy3和MXenes之间的FRET,来自Cy3-CD63适体的荧光信号被快速淬灭。加入外泌体后Cy3的荧光大大恢复,外泌体可以与适体特异性结合,并且由于适体和CD63蛋白在外泌体表面上的高亲和力而从Ti3C2 MXenes的表面释放。同时,MXenes在整个过程中的自发荧光信号变化不大,可作为标准参考。基于自标准开启的FRET生物传感平台,外泌体的检测极限为1.4×10(3)颗粒mL(-1),比常规ELISA方法低1000倍以上。该荧光传感器还可结合荧光共聚焦扫描显微镜图像用于鉴定外泌体表面上的多种生物标志物和不同种类的外泌体。所提出的策略不仅为外泌体提供了通用的纳米平台,而且可以广泛地扩展到多种生物标记物检测,这可能有望使MXenes成为生物学领域的强大候选者。


17、湖北中医药大学:基于适体纳米探针的外泌体表面蛋白质分析和检测新方法——ExoAPP
Jin, D., et al. (2018). "ExoAPP: Exosome-Oriented, Aptamer Nanoprobe-Enabled Surface Proteins Profiling and Detection." Anal Chem.  IF=6.042
携带亲代细胞遗传分子标记的肿瘤外泌体正在作为癌症诊断中的细胞“替代物”出现。外泌体的分子谱和检测提供了对癌症进展状态的无创途径,但在技术上仍然具有挑战性。该研究报告了一种外泌体导向,基于适体纳米探针的分析(ExoAPP)测定,以鉴定表面蛋白质表型和量化癌症外泌体。ExoAPP将石墨烯氧化物(GO)与靶向响应适配体连接,通过补充酶辅助的外泌体再循环来分析五种细胞类型的外泌体标记,揭示异质模式。该测定实现了低至1.6 x 10(5)粒子的检测限/mL,比其他同类方法降低了几个数量级。这种灵敏的ExoAPP测定可通过异质外泌体监测上皮-间充质转变,而不涉及经常在基于GO的货物递送中发生的细胞内化。使用ExoAPP分析来自前列腺癌患者的血液样本,发现可以通过表面PSMA鉴定靶外泌体,表明它们在临床诊断中的潜力。

18、清华大学:从血浆中快速分离和可视化检测肿瘤来源的外泌体
Chen, J., et al. (2018). "Rapid Isolation and Visible Detection of Tumor-derived Exosomes from Plasma." Anal Chem.  IF=6.042
外泌体是从多种细胞释放的纳米级细胞外囊泡(30-120 nm),其为癌症的非侵入性诊断提供了有希望的生物标志物。然而,传统的外泌体分离方法繁琐,非标准化,并且需要庞大的仪器,因此限制了其临床应用。本文首次提出了一种基于阴离子交换(AE)的分离方法,在30分钟内通过AE磁珠直接从血浆和细胞培养基中分离外泌体。通过AE磁珠分离的外泌体具有比UC更高的回收效率(> 90%)和更少的蛋白质杂质。然后,首次用适体封端的Fe3O4纳米颗粒以可视化、无标记和定量方式检测血浆中的前列腺癌(PCa)外泌体。PCa外泌体的线性范围估计为0.4×10(8)至6.0×10(8)个颗粒/mL,检测限为3.58×10(6)个颗粒/mL。本研究为外泌体的快速分离和可视化检测提供了一种有效而实用的方法,有望用于早期诊断PCa。

19、南京医科大学一附院:微小RNA和长链非编码RNA在抗癌治疗中的潜在调节作用
Xie, M., et al. (2018). "Potential Regulatory Roles of MicroRNAs and Long Noncoding RNAs in Anticancer Therapies." Mol Ther Nucleic Acids 13: 233-243.  IF=5.66

20、哈尔滨医科大学:外泌体15-LO2在体内和体外介导缺氧诱导的肺动脉高压
Zhang, M., et al. (2018). "Exosomal 15-LO2 mediates hypoxia-induced pulmonary artery hypertension in vivo and in vitro." Cell Death Dis 9(10): 1022.  IF=5.638


21、南京医科大学:DNA甲基化介导的miR-486-5p沉默通过激活PLAGL2信号通路促进结直肠癌增殖和转移
Liu, X., et al. (2018). "DNA-methylation-mediated silencing of miR-486-5p promotes colorectal cancer proliferation and migration through activation of PLAGL2/IGF2/beta-catenin signal pathways." Cell Death Dis 9(10): 1037.  IF=5.638

22、安徽医科大学:hsa-miR-500a-3P通过靶向肾上皮细胞中MLKL介导的坏死性凋亡来减轻肾损伤
Jiang, L., et al. (2018). "hsa-miR-500a-3P alleviates kidney injury by targeting MLKL-mediated necroptosis in renal epithelial cells." FASEB J: fj201801711R.  IF=5.595

23、郑州大学:间充质干细胞衍生的外泌体通过下调脊髓损伤中磷酸化的NFkappaB P65亚基来减少A1星形胶质细胞
Wang, L., et al. (2018). "Mesenchymal Stem Cell-Derived Exosomes Reduce A1 Astrocytes via Downregulation of Phosphorylated NFkappaB P65 Subunit in Spinal Cord Injury." Cell Physiol Biochem 50(4): 1535-1559.  IF=5.5

24、南京大学:在外泌体上进行Lectin介导的原位滚环扩增,用于探测癌症相关的聚糖模式
Feng, Y., et al. (2018). "Lectin-mediated in situ rolling circle amplification on exosomes for probing cancer-related glycan pattern." Anal Chim Acta 1039: 108-115.  IF=5.123

25、南京医科大学&东南大学:外泌体——癌细胞耐药性的新型介质
Zhang, H. D., et al. (2018). "Exosome: a novel mediator in drug resistance of cancer cells." Epigenomics.  IF=4.979

26、中山大学第三附属医院:MSC衍生的外泌体通过在海绵体神经损伤的大鼠模型中减轻海绵体平滑肌细胞凋亡来改善勃起功能障碍
Ouyang, X., et al. (2018). "MSC-derived exosomes ameliorate erectile dysfunction by alleviation of corpus cavernosum smooth muscle apoptosis in a rat model of cavernous nerve injury." Stem Cell Res Ther 9(1): 246.  IF=4.963

27、中山大学第一附属医院:源自miR-92a-3p过表达人间充质干细胞的外泌体通过靶向WNT5A增强软骨形成并抑制软骨降解
Mao, G., et al. (2018). "Exosomes derived from miR-92a-3p-overexpressing human mesenchymal stem cells enhance chondrogenesis and suppress cartilage degradation via targeting WNT5A." Stem Cell Res Ther 9(1): 247.  IF=4.963

28、天津医科大学总医院:过表达IL-35的间充质干细胞——一种新的免疫抑制策略和诱导移植耐受的治疗靶点
Guo, H., et al. (2018). "Mesenchymal stem cells overexpressing IL-35: a novel immunosuppressive strategy and therapeutic target for inducing transplant tolerance." Stem Cell Res Ther 9(1): 254.  IF=4.963

29、同济大学:表征三种不同类型的细胞外囊泡及其对细菌生长的影响
Yu, S., et al. (2019). "Characterization of three different types of extracellular vesicles and their impact on bacterial growth." Food Chem 272: 372-378.  IF=4.946

30、苏州大学一附院:具有缺血心肌靶向肽的工程化外泌体用于心肌梗死的靶向治疗
Wang, X., et al. (2018). "Engineered Exosomes With Ischemic Myocardium-Targeting Peptide for Targeted Therapy in Myocardial Infarction." J Am Heart Assoc 7(15): e008737.  IF=4.45

 31、第四军医大学:外泌体介导的肿瘤进展中的细胞通讯
Wan, Z., et al. (2018). "Exosome-mediated cell-cell communication in tumor progression." Am J Cancer Res 8(9): 1661-1673.  IF=3.998

 

32、南昌大学二附院:外泌体调节癌症干细胞稳态中癌细胞的转化
Xu, J., et al. (2018). "Exosomes Regulate the Transformation of Cancer Cells in Cancer Stem Cell Homeostasis." Stem Cells Int 2018: 4837370.  IF=3.989

33、苏州大学:间充质干细胞外泌体递送miRNA-132促进心肌梗死中的血管生成
Ma, T., et al. (2018). "MicroRNA-132, Delivered by Mesenchymal Stem Cell-Derived Exosomes, Promote Angiogenesis in Myocardial Infarction." Stem Cells Int 2018: 3290372.  IF=3.989

34、【综述】昆山第一人民医院:外泌体在病原体感染中的潜在功能
Wang, J., et al. (2018). "Host derived exosomes-pathogens interactions: Potential functions of exosomes in pathogen infection." Biomed Pharmacother 108: 1451-1459.  IF=3.457

35、吉林大学:外泌体介导mir-193b对RAB22A的调节抑制乳腺癌生长和转移
Sun, L., et al. (2018). "Regulation of RAB22A by mir-193b inhibits breast cancer growth and metastasis mediated by exosomes." Int J Oncol.  IF=3.333

 

36、南京市六合区人民医院:MSC外泌体通过lncRNA-KLF3-AS1/miR-206/GIT1轴在骨关节炎中促进增殖并抑制软骨细胞凋亡
Liu, Y., et al. (2018). "MSC-derived exosomes promote proliferation and inhibit apoptosis of chondrocytes via lncRNA-KLF3-AS1/miR-206/GIT1 axis in osteoarthritis." Cell Cycle.  IF=3.304
 
37、山东大学齐鲁医院:子宫内膜异位症的正位间质细胞通过外泌体途径促进神经血管生成。
Sun, H., et al. (2018). "Eutopic stromal cells of endometriosis promote neuroangiogenesis via exosome pathway." Biol Reprod.  IF=3.184

38、哈尔滨医科大学:外泌体microRNA-29a介导肥胖相关性心肌病的心功能不全和线粒体失活
Li, F., et al. (2018). "Exosomal microRNA-29a mediates cardiac dysfunction and mitochondrial inactivity in obesity-related cardiomyopathy." Endocrine.  IF=3.179

39、武汉大学:口腔扁平苔藓中循环外泌体microRNAs表达谱的差异
Peng, Q., et al. (2018). "Differentially circulating exosomal microRNAs expression profiling in oral lichen planus." Am J Transl Res 10(9): 2848-2858.  IF=3.061

 

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