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细胞粘附能力检测

一、细胞粘附能力检测介绍
1、细胞黏附性是维持组织结构稳定的基本条件,也是细胞运动和发挥功能的调节因素,并且对细胞的增值、分化有重要影响。
 
2、细胞粘附实验通常分为两类,即细胞与细胞粘附和细胞与基质粘附。机体内许多细胞,如上皮细胞固定在某处发挥功能;另一些细胞,如白细胞,活跃运动,就需要不断调节细胞粘附。细胞粘附性的改变在肿瘤转移过程中也发挥着重要作用。恶性肿瘤具有从原发瘤分离及在体内扩散的能力,提示这些细胞相互识别及粘附机制发生了改变。用到测定细胞粘附性的实验有:机械法测定细胞粘附性,发射性核素法测定细胞粘附性,细胞分离实验和肿瘤细胞聚集体形成实验。
 

二、细胞粘附能力检测实验材料
  1、试剂:MTT(BIOSHARP, Amresco 0793)、DMSO(SIGMA、D2650)
  2、仪器:超净工作台、CO2培养箱、生物倒置显微镜、酶标仪
  3、细胞株:嘉美实验中心提供细胞株,或者实验委托者提供。具体请咨询联系右上角嘉美实验技术人员QQ。
 
三、细胞粘附能力检测实验步骤
  1、包被基底膜:10g /l的BSA,50mg/L的metrigel 1:8稀释液,10mg/L FN以50Ul/孔加入96孔板,4℃过夜,BSA为对照基底。
  2、水化基底膜:吸出培养板多余液体,每孔加入50微升含10g/L的BSA无血清培养液,37℃30分钟。
  3、用胰酶消化肿瘤细胞,调整细胞密度为105/mL,分别将100ul细胞悬液接种于包被的96孔板中,各组样本为平行的4个。
  4、培养细胞:用含10g/L的BSA和1640培养液分别在37度常规培养1h
  5、MTT法检测:MTT法测定各孔光吸度值,以BSA组贴壁细胞A值为参照,计算matrigel和Fn组细胞贴壁率。
  6、细胞黏附率计算:黏附率 =【(试验组细胞A值/BSA组细胞A值)-1】×100%
 
 

四、实验委托者提供
  1、实验委托者提供实验分组情况及实验背景资料,有具体要求请事先说明;或者由嘉美实验技术人员帮助设计。
  2、实验委托者提供细胞株,或者由嘉美实验室提供。
  3、提供干预药物及其浓度。
 
具体实验咨询,请联系嘉美实验

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