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细胞成脂/成骨/成神经诱导


一、嘉美实验细胞成脂/成骨/成神经诱导介绍
1、自我更新能力和多向分化能力是干细胞的两个最基本特征。干细胞的诱导分化一方面是干细胞鉴定的主要方法,另一方面也是干细胞功能学研究的主要途径。依赖于成熟的干细胞技术平台,嘉美实验可以开展多种干细胞分化潜能研究的实验服务。
 
2、嘉美实验不仅可以提供稳定的干细胞成骨、成脂、成软骨诱导分化服务,也可以按照您的需求,为您提供成肝、成肌、成神经元的定向诱导分化服务。
 
3、嘉美实验细胞成脂/成骨/成神经诱导平台优势:
  1)10年干细胞技术和经验,拥有同行不可比拟的成熟平台。
  2)庞大的科研干细胞库,拥有数百种干细胞及培养试剂产品。
  3)引用文献达1722篇,IF累计8109分,被引用13999次。

二、嘉美实验细胞成脂/成骨/成神经诱导实验操作流程
成骨诱导培养液配备与诱导操作: 
1、准备含10%FBS的α-MEM培养液; 
2、在备好的α-MEM培养液中添加50μM 抗坏血酸, 10mmβ-磷酸甘油和100nm地塞米松; 
3、准备6孔培养板,将P4细胞按照5×103个/平方厘米的规格接种于原始α-MEM培养液中; 
4、待细胞长至基本融合后,更换上述制备完成的成骨诱导培养液; 
5、每三天换液一次,细胞长至7天时进行碱性磷酸酶染色; 
6、二十八天后再进行矿化结节的茜素红染色。 
 
素红染色方法介绍: 
1、去除细胞当前使用培养液,使用PBS清洗两次; 
2、使用10%甲醛室温固定15分钟,完成后使用重蒸馏水冲洗两次; 
3、按照1ml/孔加入40mM的茜素红染色液,室温孵育20min并轻微振荡; 
4、清除掉没有完全结合的染料,用重蒸馏水漂洗并振荡5min重复4次; 
5、倾斜放置2min,吸取多余的重蒸馏水;倒置显微镜观察拍照记录。
 
成脂诱导培养液配备与诱导操作: 
1、配置FBS10%含量的HG-DMEM培养液; 
2、在配制完成的HG-DMEM培养液中加入1μM地塞米松,10μg/ml胰岛素,200μM吲哚美辛和0.5mM IBMX; 
3、准备6孔培养板,将P4细胞按照2×104个/平方厘米的规格接种于原始HG-DMEM培养液中 
4、待细胞长至基本融合后,更换上述制备完成的成脂诱导培养液培养2天,在用只含有10μg/ml胰岛素的成脂维持培养液培养1天,如此交替循环培养至14天,使用红油O染色。 
 
红油O染色方法介绍:
1、去除细胞使用的当前培养液,使用PBS清洗两次; 
2、27.5%甲醛室温固定20分钟; 
3、重蒸馏水清洗3此,空气中干燥; 
4、加入0.5%的红油室温孵育一小时; 
5、配制70%乙醇溶液清洗3次; 
6、倒置显微镜观察拍照记录。
 

成骨诱导分化


成脂诱导分化


成软骨诱导分化-1


成软骨诱导分化-2
 
三、嘉美实验细胞成脂/成骨/成神经诱导实验注意事项及交付标准
1、客户提供细胞种类和诱导分化细胞类型,也可以由嘉美实验代买,或者免费提供嘉美实验室有的细胞。

2、交付标准:
  1)成功定向诱导分化的细胞,或者提供细胞诱导的整体实验结果。
  2)完整项目报告(材料、试剂、仪器、方法、数据分析、实验结果)。

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